O transcriptoma é o conjunto de RNAs produzidos por uma célula ou organismo em uma determinada condição. Enquanto o genoma mostra o que um organismo pode fazer, o transcriptoma mostra o que ele está de fato fazendo naquele momento. A técnica que o mede é o RNA-Seq (sequenciamento de RNA).
Por que medir expressão gênica
Ter um gene não significa usá-lo. Genes são ligados e desligados o tempo todo em resposta a estímulos — temperatura, nutrientes, presença de um produto, estresse. Medir quais genes estão ativos revela os mecanismos por trás de um efeito observado.
Como funciona o RNA-Seq
1. Extração do RNA da amostra, com cuidado redobrado por ser uma molécula instável.
2. Construção da biblioteca de sequenciamento a partir do RNA.
3. Sequenciamento em NGS, tipicamente com leituras paired-end e milhões de leituras por amostra.
4. Análise de expressão: quantificação dos transcritos e comparação entre condições.
Análise de expressão diferencial
Comparando duas ou mais condições (por exemplo, com e sem tratamento), identificam-se os genes que aumentam ou diminuem a atividade. Essa análise de expressão diferencial é o coração de muitos estudos de mecanismo de ação.
Aplicações do transcriptoma
- Entender o mecanismo de ação de um produto ou estímulo.
- Estudar a resposta de um organismo a estresse ou a condições adversas.
- Investigar regulação gênica e vias metabólicas ativas.
- Apoiar o desenvolvimento de bioprodutos com base em evidência funcional.
No protocolo de transcriptoma da GoGenetic, cobrimos desde a extração de RNA até o sequenciamento com cerca de 10 milhões de leituras, sempre acompanhado da interpretação que conecta a expressão ao seu objetivo de pesquisa.
Perguntas frequentes (FAQ)
O que é transcriptoma?
É o conjunto de RNAs ativos em uma célula ou organismo em uma dada condição, ou seja, o retrato dos genes que estão sendo efetivamente usados naquele momento.
Qual a diferença entre genoma e transcriptoma?
O genoma mostra todos os genes que um organismo possui (o que ele pode fazer); o transcriptoma mostra quais genes estão ativos (o que ele está fazendo).
O que é RNA-Seq?
É a técnica de sequenciamento do RNA de uma amostra para medir a expressão gênica, identificando e quantificando os transcritos presentes.
Para que serve a análise de expressão diferencial?
Serve para comparar condições e descobrir quais genes têm a atividade aumentada ou reduzida, revelando mecanismos de ação e respostas biológicas.
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